猕猴桃原浆中多酚类物质的抗氧化活性评价

评价猕猴桃原浆中多酚类物质的抗氧化活性，需结合体外化学评价（快速量化）与体内/细胞评价（功能验证），核心围绕“自由基清除能力、氧化损伤抑制、活性成分关联”展开，具体评价体系及关键指标如下：

一、核心评价方法：从体外量化到功能验证

猕猴桃原浆中的多酚类物质（如绿原酸、芦丁、槲皮素）是抗氧化活性的主要载体，不同评价方法针对其不同作用机制，需组合使用以全面反映活性。

1. 体外化学评价：快速测定抗氧化能力（常用且普及）

通过模拟体内氧化环境，量化多酚清除自由基或抑制氧化反应的能力，操作简便、重复性高，适合批量样品筛选。

DPPH自由基清除法

原理：DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）是稳定的自由基，呈紫色，多酚可提供氢原子使其还原为无色产物，通过吸光度变化（517nm）计算清除率。

评价指标：IC₅₀值（清除 50% DPPH自由基所需的原浆浓度，单位mg/mL），IC₅₀越小，抗氧化活性越强。

猕猴桃原浆参考值：鲜榨原浆IC₅₀通常为0.8-1.5mg/mL，经超高压杀菌后 IC₅₀变化＜10%（多酚保留好），热杀菌后IC₅₀可能升至1.8-2.5mg/mL（部分多酚氧化）。

ABTS自由基清除法

原理：ABTS（2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）与氧化剂反应生成蓝绿色自由基阳离子（ABTS⁺），多酚可使其还原，通过734nm吸光度下降计算清除能力。

评价指标：Trolox等效抗氧化能力（TEAC），即1g原浆的抗氧化活性相当于多少mg Trolox（水溶性维生素E类似物），TEAC值越高，活性越强。

猕猴桃原浆参考值：TEAC通常为15-25mg Trolox/100g原浆，绿原酸含量高的品种（如“徐香”）TEAC 值更高。

FRAP 铁还原抗氧化能力法

原理：在酸性条件下，多酚可将Fe3⁺-TPTZ（三吡啶三吖嗪）复合物还原为蓝色Fe2⁺-TPTZ，通过593nm 吸光度计算还原能力（反映多酚提供电子的能力）。

评价指标：FRAP值（单位μmol Fe2⁺/g原浆），直接对应多酚的还原活性。

猕猴桃原浆参考值：FRAP值通常为80-120μmol Fe2⁺/g原浆，与多酚总量呈正相关（相关系数 r＞0.8）。

总酚含量（TPC）关联评价

原理：通过福林-酚法测定原浆中总酚含量（以没食子酸当量GAE计，单位mg GAE/100g），总酚含量是抗氧化活性的基础 —— 多酚含量越高，通常抗氧化能力越强（但需结合具体成分活性，如槲皮素活性高于绿原酸）。

猕猴桃原浆参考值：鲜榨原浆TPC通常为50-80mg GAE/100g，果皮中的多酚含量是果肉的2-3倍，带皮榨汁的原浆TPC可提升至100-120mg GAE/100g。

2. 细胞/体内评价：验证生理功能相关性（更贴近实际应用）

体外化学评价仅反映“潜在活性”，细胞或体内实验可验证多酚对生物体系的氧化损伤保护作用，更具实际意义。

细胞氧化损伤保护实验

方法：用H₂O₂诱导人肝细胞（HepG2）或成纤维细胞产生氧化应激（模拟体内氧化损伤），加入不同浓度的猕猴桃原浆多酚提取物，检测细胞存活率、活性氧（ROS）水平、抗氧化酶（SOD、GSH-Px）活性。

关键指标：当原浆多酚浓度为50-100μg/mL时，可使H₂O₂损伤的细胞存活率提升20%-30%，ROS水平降低35%-45%，SOD活性提升15%-25%，表明其能有效抑制细胞内氧化应激。

动物体内抗氧化实验

方法：给小鼠灌胃猕猴桃原浆（10-20 mL/kg 体重），连续14天后，检测血清、肝脏中的丙二醛（MDA，氧化损伤标志物）含量及SOD、GSH-Px活性。

关键结果：灌胃组小鼠血清MDA含量比对照组降低20%-30%，肝脏SOD活性提升18%-28%，证明原浆多酚可在体内发挥抗氧化作用，减少脂质氧化损伤。

二、影响猕猴桃原浆多酚抗氧化活性的关键因素

评价活性时需结合原浆的加工与储存条件，这些因素直接影响多酚含量与活性：

品种差异：不同猕猴桃品种的多酚组成与含量不同，抗氧化活性差异显著。例如，“徐香”“海沃德”的绿原酸含量较高，TEAC值比“红心猕猴桃”高15%-20%；野生猕猴桃的多酚总量是栽培品种的1.5-2倍，抗氧化活性更强。

加工方式：

杀菌方式：超高压杀菌（600MPa，常温）可保留90%以上的多酚，抗氧化活性损失＜10%；热杀菌（100℃，5min）会导致多酚氧化（尤其绿原酸），活性损失25%-35%。

榨汁方式：带皮榨汁的原浆多酚含量比去皮榨汁高50%-80%，但可能因果皮中的酶（如PPO）导致褐变，需配合快速灭酶（如70℃加热 1 min）。

储存条件：常温储存（25℃）会加速多酚氧化，1个月后TPC 降低15%-20%，抗氧化活性下降 10%-15%；低温冷藏（0-4℃）或避光储存可减缓氧化，3个月内活性损失＜8%。

三、评价体系总结：多方法组合，兼顾“量化”与“功能”

全面评价猕猴桃原浆多酚的抗氧化活性，需遵循“基础量化→功能验证→条件关联”的逻辑：

先用总酚含量（TPC） 确定多酚基础水平，再通过DPPH、ABTS、FRAP三种体外方法量化抗氧化能力（避免单一方法的局限性）；

若需验证实际应用价值，进一步开展细胞氧化损伤保护实验，必要时通过动物实验确认体内活性；

最后结合品种、加工、储存条件，分析活性差异的原因，为原浆生产工艺优化（如选择超高压杀菌、低温储存）提供依据。

猕猴桃原浆中的多酚类物质具有显著的抗氧化活性，体外评价可快速量化其自由基清除能力（常用DPPH、ABTS法），细胞/体内实验可验证其对生物体系的氧化保护作用；实际评价中需结合原浆的品种、加工与储存条件，才能全面、准确反映其抗氧化潜力。

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